《最后的晚餐》（意大利語：l'ultima cena）是一幅广为人知的大型壁画，文艺复兴时期由列奥纳多·达·芬奇於米兰的天主教恩寵聖母的多明我会院食堂墙壁上绘成。1980年被列为世界遺產。
高4.6米，寬8.8米，画面利用透视原理，使观众感觉房间随画面作了自然延伸。为了構圖使徒坐得比正常就餐的距离更近，并且分成四组，在耶稣周围形成波浪状的层次。越靠近耶稣的门徒越显得激动。耶稣坐在正中间，他摊开双手镇定自若，和周围紧张的十二门徒形成鲜明的对比。耶稣背后的门外是祥和的外景，明亮的天空在他头上彷彿一道光环。他的双眼注视画外，仿佛看穿了世间的一切炎凉。最後的晚餐的畫中窗外显示是白天，因此被人列為疑點。
《最後的晚餐》壁畫取材自基督教聖經馬太福音第26章，描繪耶穌在遭羅馬兵逮捕的前夕和十二宗徒共進最後一餐時預言「你們其中一人將出賣我」後，門徒們顯得困惑、哀傷與騷動，紛紛詢問耶穌：「主啊，是我嗎？」的瞬間情景。唯有坐在耶穌右側（即畫面正方左邊第三位）的叛徒猶達斯（基督新教中文作猶大）驚慌地將身體往後傾，一手抓着出賣耶穌的酬勞——一個裝有三十塊銀幣的錢袋，臉部顯得陰暗。
據說達文西在繪作此圖時，所有人面孔皆已設想好，惟有加略人猶大未想好。當教堂神父來催達文西時，與其談到此問題，恰好該神父對其主教有點微詞，聽聞達文西欲用主教之臉當作猶大的臉孔，連聲同意，並開懷大笑。
一般都以达芬奇的《最後的晚餐》作為文藝復興極盛時期的起點，這幅壁畫完成的時間約在1495至1498年間。
為了呈現出每位門徒的形象，达芬奇將這戲劇性的一幕安排在一個大型食堂裡，讓聚集在長條桌一方的耶穌及其門徒都能面對觀眾，傳神的刻劃出每位門徒在瞬間所顯現的驚異又複雜的表情。畫面的構圖以耶穌為中心向兩旁展開，就像一個等邊三角形，再以高低起伏的人物動作形成三人一組的四個小三角形，使畫面顯得協調平衡又富有動態感，同時確立了文藝復興極盛時期高度理想化的構圖原則與表現手法。
达芬奇還運用正確的透視法成功呈現出「最後的晚餐」中的立體空間構圖。透視法，也稱為「投影法」，是將三維實際物體或景物描繪在二維圖面上，由於二維平面要表現出三維景物的立體感與相互之間的空間距離關係，必須解決不同媒介的視角轉換，達成似真的視覺效果。「最後的晚餐」中使用的「交點透視法」是以景物中的天花板、牆角、地磚、壁柱連線、桌椅左右邊線、窗框上下邊線或斜角陰影邊線等的假設延長線，相交於畫面深處消失的一點，營造出景觀深入的感覺。畫中食堂兩邊的牆與天花板上一格格的嵌板都向後退，創造一種景深的效果，最後集中並消失在耶穌頭上後方的窗戶，這一點正是整個壁畫的中心點，也是視覺的焦點。窗戶的光線極其自然的落在耶穌的頭上，形成光環的效果，完美的表達了耶穌的神性，可說是透視法極其成功的運用。
2012年電影《浴血任務2》有一張海報，主角們與反派同坐一桌餐桌，跟《最後的晚餐》風格幾分相似。
2018年電影《復仇者聯盟3》於宣傳階段時，有網友特地合成《最後的晚餐》風格的海報，而對應原畫作，坐在猶大位置上的是雷神索爾的義弟洛基。
2018年電玩《孤島驚魂5》的遊戲封面，主要反派同坐一桌，跟《最後的晚餐》雷同。
2018年動畫《黃金神威》其中一幕主要角色同坐排列跟《最後的晚餐》雷同，坐在猶大位置上的是奇羅藍克。
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